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概述
?小動物活體成像技術(shù)因具有直接觀測、可同時觀測多個實驗動物，對同一個研究個體可進行長時間反復(fù)跟蹤成像又不需殺死動物等優(yōu)點，故被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域。目前，小動物活體成像主要采用生物發(fā)光和熒光兩種技術(shù)。
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原理
生物發(fā)光通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將熒光素酶基因標記受體細胞或DNA，利用其產(chǎn)生的蛋白酶與相應(yīng)的底物發(fā)生生化反應(yīng)，在生物體內(nèi)產(chǎn)生光信號(自發(fā)光，其信號的發(fā)射不需要外部光源激發(fā))。
熒光技術(shù)采用熒光報告基因( GFP、RFP)或熒光染料進行標記，利用報告基因產(chǎn)生熒光蛋白或染料產(chǎn)生的熒光，在生物體內(nèi)形成光源(需要外部能量激發(fā))。
（熒光技術(shù)原理）
名稱 | 優(yōu)點 | 缺點 |
生物發(fā)光 | ||
熒光技術(shù) | ①高靈敏度;②標記物選擇多，標記方式更靈活;③方便、成本低。 | ①相對低空間分辨率;②熒光染料可能有毒性。 |
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應(yīng)用
舉例：
1.不同治療方案對小鼠結(jié)腸癌腹腔轉(zhuǎn)移模型的效果比較
2.皮膚移植（干細胞治療）領(lǐng)域的應(yīng)用
（表皮移植4天后，IVScope 8500成像，曝光時間5min）
3.肺腫瘤研究領(lǐng)域的應(yīng)用
4周齡雌性Nod/Scid免疫缺陷小鼠，尾靜脈注射A549肺癌細胞，5周后用IVScope 8200系統(tǒng)檢測，檢測前10min腹腔注射底物熒光素，并注射4%水合氯醛麻醉。
4.不同部位腫瘤模型鑒定
5.熒光標記物示蹤（Ex735/Em810熒光通道）
DiR染料標記293細胞，尾靜脈注射后拍攝（左右二列間隔半小時拍攝；第一行均為對照組，第二行均為實驗組）
實驗組解剖后拍攝（肝臟、肺、脾臟有明顯信號）
6.視神經(jīng)損傷模型鑒定
7.腫瘤模型構(gòu)建（生物發(fā)光）
8.腦膠質(zhì)瘤模型的鑒定
勤翔小動物活體成像系統(tǒng)
IVScope8000系列小動物活體成像系統(tǒng),是上海勤翔推出的高靈敏度、多功能活體成像系統(tǒng)。它采用一級背部感光薄化超低溫CCD相機、搭配特殊設(shè)計的暗箱、自動加熱樣品臺及專業(yè)的圖像處理軟件等，能滿足客戶的多種實驗需求。
硬件特色
①可選配薄化背照式制冷CCD相機，量子效率至高可達95%；
②CCD相機至低制冷溫度可達-100℃；
③F0.8超大光圈，保障足夠進光量，保障微弱信號也能捕捉到；
④隔絕外界光線的封閉暗箱設(shè)計，在正常實驗室光照條件下即可成像；
⑤6組熒光光源和濾光片組合可供選擇，至多能夠同時裝載5組。觀測范圍涵蓋了紫外、可見光及近紅外波段，使得市面上幾乎所有的熒光染料都可以使用。
⑥電動升降樣品臺，3檔位置可調(diào)，滿足不同視野大小的成像要求。至多可以同時滿足5只小鼠的成像需求；
⑦樣品臺具有恒溫加熱功能，至大程度保障所有實驗數(shù)據(jù)是在小動物的正常生理狀態(tài)下測得；
⑧可選配氣體麻醉系統(tǒng)，方便實驗操作；
⑨支持外接980nm/808nm激光器，搭配鵝頸管支架，滿足用戶對于上轉(zhuǎn)換熒光實驗的需求。
軟件特色
（小動物活體成像系統(tǒng)軟件界面）
①實時監(jiān)控：可通過預(yù)覽功能在軟件窗口對樣品進行實時檢測；
②圖像連續(xù)采集：通過軟件設(shè)置曝光時間和連續(xù)幀數(shù)，連續(xù)拍攝一組圖像而不會錯過短暫熒光或生物發(fā)光信號，拍攝結(jié)果自動保存；
③圖像編輯：具有圖像的旋轉(zhuǎn)、裁剪、反色等處理功能，進行圖像優(yōu)化處理；
④偽彩疊加：調(diào)色板色彩豐富，讓用戶可根據(jù)自己的使用習(xí)慣疊加偽彩，從而大大增加肉眼對灰階圖像的視覺分辨能力；
⑤軟件算法強大：可對ROI區(qū)域進行分析，并具有圖像批處理功能；
⑥預(yù)置拍攝參數(shù)：自動保存及讀取拍攝參數(shù)，避免拍攝時重復(fù)設(shè)置參數(shù)；
⑦ 模塊控制功能：可通過電腦實現(xiàn)對系統(tǒng)每個模塊的控制，包括對升降臺、熒光系統(tǒng)和濾鏡輪的控制；
⑧支持以動態(tài)視頻形式輸出實驗結(jié)果。
助力科研-IVScope客戶應(yīng)用論文
1.Near-Infrared Light-Controlled and Real-Time Detection of Osteogenic Differentiation in Mesenchymal Stem Cells by Upconversion Nanoparticles for
Osteoporosis Therapy.doi. org/10.1021/acsnano.2c02900
2.Near-Infrared Light-Controlled Activation of Adhesive Peptides Regulates Cell Adhesion and Multidifferentiation in Mesenchymal Stem Cells on an Up-Conversion Substrate.doi.org/10.1021/acs.nanolett.1c04534
3.A novel near-infrared xanthene-based fluorescent probe for detection of thiophenpl in vitro and in vivo.doi:10.1039 /d0nj03370g
4.A near-infrared phosphorescent iridium(Ⅲ)complex for fast and time-resolved detection of cysteine and homocystenine. doi:10.1039/C8AN01107A
5.A Near-Infrared Xanthene Fluorescence Probe for Monitoring Peroxynitrite in Living Cells and Mouse Inflammation Model.doi:10.1039/C8AN01107A
6.Development of near-infrared xanthene fluorescence probe for the hinghly selective and sentive detection of cysteine. doi:10.1016/j.dyepig.2019.107563
7.A time-resolved near-infrared phosphorescent iridium(Ⅲ) complex for fast anf highly specific peroxynitrite detection and bioimaging applications.doi:10.1039/c9tb01673b
8.pH-responsive delivery of H2 through ammonia borane-loaded mesoporous silica nanoparticles improves recovery after spinal cord injury by moderating oxidative stress and regulating microglial polarization.Regenerative Biomaterials,doi.org/10.1093/rb/rbab058
轉(zhuǎn)載：江西立康 公眾號 鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/GjeDtwM_ov7IIq_ufDU9ag
